基于苝激基缔合物的甲基化酶活性的检测方法及其甲基化酶抑制剂的筛选方法

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专利名称 基于苝激基缔合物的甲基化酶活性的检测方法及其甲基化酶抑制剂的筛选方法 申请号 CN201410149222.X 专利类型 发明专利 公开(公告)号 CN103911454A 公开(授权)日 2014.07.09 申请(专利权)人 中国科学院长春应用化学研究所 发明(设计)人 于聪;王燕;陈健 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I IPC主分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/48(2006.01)I;C12Q1/44(2006.01)I 专利有效期 基于苝激基缔合物的甲基化酶活性的检测方法及其甲基化酶抑制剂的筛选方法 至基于苝激基缔合物的甲基化酶活性的检测方法及其甲基化酶抑制剂的筛选方法 法律状态 实质审查的生效 说明书摘要 本发明提供基于苝激基缔合物的甲基化酶活性的检测方法及其甲基化酶抑制剂的筛选方法,属于生物技术领域。该方法先制备双链DNA,然后将双链DNA与S-腺苷甲硫氨酸、限制性内切酶和不同浓度的甲基化酶反应,得到混合溶液;将末端脱氧核苷酸转移酶、脱氧核糖核苷三磷酸和TdT反应缓冲液与混合溶液反应,得到反应溶液;最后将苝衍生物探针与聚阳离子的混合溶液和反应溶液反应,对甲基化酶的活性进行荧光检测。本发明还提供一种甲基化酶抑制剂的筛选方法。本发明利用小分子探针单体与激基缔合物荧光强度比值的变化来检测甲基化酶和抑制剂的活性,测试给出的是两个荧光信号的比值,比起单纯荧光增强或减弱的信号,不易受到干扰,灵敏度更高。

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