| 专利名称 | 一种短须裂腹鱼心脏细胞系的构建和超低温冷冻保存方法 | 申请号 | CN201310400091.3 | 专利类型 | 发明专利 | 公开(公告)号 | CN103409365A | 公开(授权)日 | 2013.11.27 | 申请(专利权)人 | 中国科学院昆明动物研究所 | 发明(设计)人 | 王晓爱;潘晓赋;杨君兴;刘倩;陈小勇 | 主分类号 | C12N5/071(2010.01)I | IPC主分类号 | C12N5/071(2010.01)I;A01N1/02(2006.01)I | 专利有效期 | 一种短须裂腹鱼心脏细胞系的构建和超低温冷冻保存方法 至一种短须裂腹鱼心脏细胞系的构建和超低温冷冻保存方法 | 法律状态 | 实质审查的生效 | 说明书摘要 | 本发明涉及一种短须裂腹鱼心脏细胞系的构建和超低温冷冻保存的方法,属于淡水水生生物细胞培养和超低温冷冻保存技术领域。该方法是以短须裂腹鱼心脏组织为材料,采用组织块法和两酶消化法,在含有胎牛血清和细胞生长因子,pH值为7.0-7.2?的M199培养液中培养;采用胰蛋白酶消化法进行传代培养;具体包括制备细胞培养液、原代培养及传代培养步骤。本发明的有益效果在于:1、操作简便;2、降低了纯组织块法对心脏细胞的损伤;3、构建的短须裂腹鱼心脏细胞系形态为成纤维样,生长状态良好,能够连续传代并直接应用于生物学特性研究,满足了对短须裂腹鱼种质资源保存和理论研究及应用的需要;4、该构建方法也适用于其他鱼类构建心脏细胞系。 |
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