一种杀鞘翅目害虫的苏云金芽孢杆菌工程菌及制备方法和应用

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专利名称 一种杀鞘翅目害虫的苏云金芽孢杆菌工程菌及制备方法和应用 申请号 CN201310316560.3 专利类型 发明专利 公开(公告)号 CN103396977A 公开(授权)日 2013.11.20 申请(专利权)人 中国科学院武汉病毒研究所 发明(设计)人 高梅影;余亚军;刘朋明;吴丹丹;吴燕 主分类号 C12N1/21(2006.01)I IPC主分类号 C12N1/21(2006.01)I;A01N63/02(2006.01)I;A01P7/04(2006.01)I;C12R1/07(2006.01)N 专利有效期 一种杀鞘翅目害虫的苏云金芽孢杆菌工程菌及制备方法和应用 至一种杀鞘翅目害虫的苏云金芽孢杆菌工程菌及制备方法和应用 法律状态 实质审查的生效 说明书摘要 本发明公开了一种杀鞘翅目害虫的苏云金芽孢杆菌工程菌及制备方法和应用,CCTCC?M2013259。其步骤:A、从杀鞘翅目害虫的Bt菌株YC-03中克隆杀虫晶体蛋白基因cry3Aa8,将该基因插入解离载体pHT304/res中,获得重组质粒pHT3Aa8/res,将pHT3Aa8/res的DNA电转Bt无晶体突变株BMB171,筛选获得转化子,将辅助质粒pBMB1200转入转化子中,挑取在Amp/Erm平板上不生长在LB平板上生长的阳性转化子,在LB液体培养基中传代,挑取在LB平板上生长在四环素平板上不生长的单菌落;B、以柳蓝叶甲和猿叶虫幼虫为试虫,进行毒力生测,比较毒力致死中量LC50,筛选到高毒力工程菌菌株Ace-38。方法易行,操作简便,对鞘翅目的柳兰叶甲、马铃薯甲虫、蔬菜猿叶虫、黄守瓜等多种害虫具有高效毒杀作用,该菌发酵性能优良,具有开发、应用前景。

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