一种定向筛选同源重组PGC的载体及构建方法和应用

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专利名称 一种定向筛选同源重组PGC的载体及构建方法和应用 申请号 CN201310341471.4 专利类型 发明专利 公开(公告)号 CN103397046A 公开(授权)日 2013.11.20 申请(专利权)人 中国科学院水生生物研究所 发明(设计)人 孙永华;熊凤;魏志强;朱作言 主分类号 C12N15/63(2006.01)I IPC主分类号 C12N15/63(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I 专利有效期 一种定向筛选同源重组PGC的载体及构建方法和应用 至一种定向筛选同源重组PGC的载体及构建方法和应用 法律状态 实质审查的生效 说明书摘要 本发明公开了一种定向筛选同源重组PGC的载体及制备方法和应用,将表达框UAS:mRFP-UTRnos1和表达框UAS:puma-UTRnos1串联构建出一种可定向筛选同源重组PGC的载体p(UAS:mRFP,UAS:puma),其序列为SEQIDNO.1所示。该载体具有荧光特异高效标记PGC的作用,又具有促凋亡基因特异剔除PGC的作用。以p(UAS:mRFP,UAS:puma)为载体骨架,将打靶基因同源序列的左右臂分别置于表达框UAS:mRFP-UTRnos1的两侧,并且使表达框UAS:puma-UTRnos1位于同源序列的外侧,制备出同源重组载体。在Tg(kop:KalTA4)胚胎中导入同源重组载体,挑选出在PGC中表达mRFP的胚胎,即为在生殖细胞中发生了同源重组的胚胎。

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