临床样本中结核分枝杆菌及吡嗪酰胺耐药性联合检测方法

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专利名称 临床样本中结核分枝杆菌及吡嗪酰胺耐药性联合检测方法 申请号 CN201210345181.2 专利类型 发明专利 公开(公告)号 CN102925554A 公开(授权)日 2013.02.13 申请(专利权)人 中国科学院武汉病毒研究所 发明(设计)人 危宏平;李恒;周满;耿学磊;王殿冰;余军平;张先恩 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I IPC主分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/34(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12R1/32(2006.01)N 专利有效期 临床样本中结核分枝杆菌及吡嗪酰胺耐药性联合检测方法 至临床样本中结核分枝杆菌及吡嗪酰胺耐药性联合检测方法 法律状态 实质审查的生效 说明书摘要 本发明涉及临床样本中结核分枝杆菌及其吡嗪酰胺耐药性的联合检测方法,步骤是:A、提取样本中的DNA;B、通过荧光定量PCR扩增含有全长吡嗪酰胺酶基因(pncA)的结核基因组片段来检测结核分枝杆菌;C、对结核分枝杆菌阳性样本,进行吡嗪酰胺耐药性的检测;吡嗪酰胺耐药性检测的步骤为:1.以荧光定量PCR产物为模板再进行一次PCR反应添加体外表达元件;2、将此PCR产物加入到无细胞表达系统中,表达吡嗪酰胺酶;3、通过该样本与标准菌株的吡嗪酰胺酶活性对比,给出吡嗪酰胺耐药性结果。本发明将荧光定量PCR扩增全长pncA基因结合体外表达的吡嗪酰胺酶酶活性,实现了样本中结核分枝杆菌及其吡嗪酰胺耐药性的联合检测,无需细菌培养和DNA测序仪。

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