一种长PCR步移试剂盒及其使用方法和应用

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专利名称 一种长PCR步移试剂盒及其使用方法和应用 申请号 CN200910214350.7 专利类型 发明专利 公开(公告)号 CN101812494A 公开(授权)日 2010.08.25 申请(专利权)人 中国科学院南海海洋研究所 发明(设计)人 罗鹏;苏婷;任春华;胡超群 主分类号 C12P19/34(2006.01)I IPC主分类号 C12P19/34(2006.01)I;C12R1/63(2006.01)N 专利有效期 一种长PCR步移试剂盒及其使用方法和应用 至一种长PCR步移试剂盒及其使用方法和应用 法律状态 实质审查的生效 说明书摘要 本发明公开了一种长PCR步移试剂盒及其使用方法和应用。本发明长PCR步移试剂盒包括:(1)试剂A:其中,每9.25~12.5μL试剂A中包含10mmol/L的dNTP1~3μL,25mmol/L?MgCl23~4μL,10×PCR缓冲液5μL及LA?Taq酶0.25~0.5μL;(2)试剂B:ddH2O5~20mL;(3)试剂C:琼脂糖5~20g;(4)试剂D:6×PCR上样缓冲液1~5mL;(5)试剂E:核酸染料20~100μL;(6)试剂F:50×电泳缓冲液10~20mL;(7)引物11条,序列如SEQ?ID?NO:1~11所示,每条各10~50μL。本发明长PCR步移试剂盒成本低,较之其它扩增方法明显简单、快速,效率高,一次即可获得长达3Kb以上的侧翼片段,用于获取DNA侧翼未知序列没有物种限制,可广泛用于分子生物学实验中。

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