一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法

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专利名称 一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法 申请号 CN201010252608.5 专利类型 发明专利 公开(公告)号 CN101948529A 公开(授权)日 2011.01.19 申请(专利权)人 中国科学院过程工程研究所 发明(设计)人 苏志国;张焱;罗坚;马光辉 主分类号 C07K14/76(2006.01)I IPC主分类号 C07K14/76(2006.01)I;C07K14/79(2006.01)I;C07K1/20(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I 专利有效期 一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法 至一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法 法律状态 实质审查的生效 说明书摘要 本发明一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法,其步骤为:选取含有金属离子结合蛋白的待分离物料,添加沉淀剂进行沉淀粗分离获得蛋白混合物。在蛋白混合物中添加过量的螯合剂去除目标蛋白的辅基金属离子I,透析去除螯合剂后添加适量不易沉淀的金属离子II,以保持目标蛋白的三级结构。将处理所得蛋白混合物进行疏水层析分离操作,并在层析缓冲液中添加适量的金属离子II,由于金属离子辅基II可以有效地保持目标蛋白的天然结构,因此可以有效地提高目标蛋白与杂蛋白在疏水层析中的分辨率。进一步通过凝胶过滤层析可以得到高纯度、高回收率的金属离子结合蛋白的纯品,生产工艺稳定,适于规模化生产。

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