白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法

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专利名称 白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法 申请号 CN03152968.2 专利类型 发明专利 公开(公告)号 CN1493687 公开(授权)日 2004.05.05 申请(专利权)人 中国科学技术大学;山东省医学科学院基础医学研究所 发明(设计)人 田志刚;张建;魏海明;张建华;孙汭 主分类号 C12N5/08 IPC主分类号 C12N5/08;C12N15/79 专利有效期 白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法 至白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法 法律状态 实质审查的生效 说明书摘要 本发明公开了一种白细胞介素-15基因修饰的 自然杀伤细胞株及其制备方法,该细胞株表型为CD56强阳性, CD16和CD3均为阴性,其形态为分散的、半贴壁生长状态。 其制备方法,是将IL-15的cDNA编码区插入pcDNA3真核 表达载体,构建分泌型重组真核表达载体pcDNA3/IL-15;利 用脂质体转染NK-92细胞;在筛选培养基中加入 Geneticin(G418)进行筛选;有限稀释克隆化细胞,以IL-15的 依赖细胞株测定克隆细胞培养上清中IL-15的活性,从中挑 选出表达IL-15的阳性细胞克隆;将该克隆在20~100活性 单位的IL-15的完全α-MEM培养基中进行扩增,得到具有 临床应用价值的工程细胞株。适于临床用于过继免疫治疗肿 瘤。

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