白细胞介素-12的高效表达方法

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专利名称 白细胞介素-12的高效表达方法 申请号 CN03131567.4 专利类型 发明专利 公开(公告)号 CN1467292 公开(授权)日 2004.01.14 申请(专利权)人 中国科学技术大学 发明(设计)人 田志刚;刘文涛;魏海明 主分类号 C12N15/24 IPC主分类号 C12N15/24;C12N5/08 专利有效期 白细胞介素-12的高效表达方法 至白细胞介素-12的高效表达方法 法律状态 实质审查的生效 说明书摘要 白细胞介素-12的高效表达方法涉及一种由生 物技术制备白细胞介素-12(IL-12)的方法,该方法分别将IL -12的P40亚单位编码区cDNA插入pcDNA3真核表达载体、 将IL-12的P35亚单位编码区cDNA插入pEE14真核高效表 达载体,分别构建了pcDNA3/p40、pEE14/p35两种真核细胞 重组质粒,共转染宿主细胞后,在筛选培养基中同时加入G418 和MSX进行筛选,挑取存活的阳性克隆,对各阳性克隆加压 扩增,获得高表达IL-12的工程细胞株。该方法简便的利用 IL-12 P40和P35天然表达不平衡的特性,采用两种表达效率 不同的载体,以使两条链的表达尽量平衡。

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