利用慢病毒载体介导RNAi的方法

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专利名称 利用慢病毒载体介导RNAi的方法 申请号 CN201110110644.2 专利类型 发明专利 公开(公告)号 CN102206645A 公开(授权)日 2011.10.05 申请(专利权)人 中国科学院武汉病毒研究所 发明(设计)人 胡康洪;王薇薇;彭洪泉 主分类号 C12N15/113(2010.01)I IPC主分类号 C12N15/113(2010.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I 专利有效期 利用慢病毒载体介导RNAi的方法 至利用慢病毒载体介导RNAi的方法 法律状态 实质审查的生效 说明书摘要 本发明是一种利用慢病毒载体介导RNAi的方法,具体是:先对相关病毒的核酸序列进行同源性分析,找出保守区域,设计出针对相关病毒保守区域的siRNA;将siRNA克隆到表达质粒pLVTH后,再与pCMV-dR8.91、pMD2.G共同转染293T细胞中,收集转染后细胞上清,经超速离心、纯化、浓缩后形成了表达siRNA的高滴度的慢病毒载体,然后将其与LV-tTR-KRAB共转导入靶细胞,并且利用四环素类似物DOX来严格控制siRNA药物作用的时间及剂量。本发明因其高效的转导率及严格的控制体系可以真实的评价siRNA在体内的抗病毒作用,同时可以追踪药物干扰作用的全过程,从而为临床提供了使用前景。

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