| 专利名称 | 一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用 | 申请号 | CN201110093484.5 | 专利类型 | 发明专利 | 公开（公告）号 | CN102191213A | 公开（授权）日 | 2011.09.21 | 申请（专利权）人 | 中国科学院武汉病毒研究所 | 发明（设计）人 | 危宏平;赵金凤;王殿冰;张治平;张先恩 | 主分类号 | C12N1/21(2006.01)I | IPC主分类号 | C12N1/21(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N9/02(2006.01)I;C12Q1/66(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N | 专利有效期 | 一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用 至一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用 | 法律状态 | 实质审查的生效 | 说明书摘要 | 本发明一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用，包括步骤：1.突变酶突变位点的引入：2．鉴定重组质粒；3．测序，获得带有1060位突变位点的PCR片段；4．经胶回收纯化后，用限制性内切酶，获得大肠杆菌；5．鉴定重组质粒，得到一种分离的蛋白基因；6．培养大肠杆菌；7．将重组质粒转化BL21感受态细胞，得到表达突变酶的菌株；8．将上述获得的BL21表达菌株培养；9．将5蛋白的菌液离心，再通过超声破碎，离心获取上清；10．测定，获得有高热稳定性又有高酶活的萤火虫荧光素酶。一种萤火虫荧光素酶的基因在食品、医药、菌体检测上的应用。该突变酶的发光强度是野生型的15-20倍左右，并且较野生型具有良好的热稳定性。 |
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