| 专利名称 | 大菱鲆呼肠孤病毒全基因组及其应用 | 申请号 | CN201010162345.9 | 专利类型 | 发明专利 | 公开（公告）号 | CN101864435A | 公开（授权）日 | 2010.10.20 | 申请（专利权）人 | 中国科学院水生生物研究所 | 发明（设计）人 | 张奇亚;柯飞 | 主分类号 | C12N15/46(2006.01)I | IPC主分类号 | C12N15/46(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12N5/16(2006.01)I;C07K14/14(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I | 专利有效期 | 大菱鲆呼肠孤病毒全基因组及其应用 至大菱鲆呼肠孤病毒全基因组及其应用 | 法律状态 | 实质审查的生效 | 说明书摘要 | 本发明公开了一种大菱鲆呼肠孤病毒全基因组及及制备方法和应用，其步骤是：A、大菱鲆呼肠孤病毒核酸的提取，使用Trizol?Reagent试剂提取大菱鲆呼肠孤病毒dsRNA核酸。B、连接人工接头，提纯的病毒核酸于琼脂糖凝胶电泳，使用凝胶回收试剂盒，回收各节段dsRNA。C、逆转录，连上人工接头的dsRNA使用引物逆转录；D、PCR扩增及序列测定，取2μl?cDNA?PCR扩增，将扩增条带切下，回收后连接到载体，挑选阳性克隆测序；E、NS22基因在鱼类培养细胞内的表达及起始密码子的确定，将S7节段1-613碱基的核苷酸序列于载体设计构建成真核表达质粒。一种大菱鲆呼肠孤病毒基因序列及其编码蛋白在制备大菱鲆呼肠孤病毒诊断试剂或作为细胞融合诱导剂中的用途。 |
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