| 专利名称 | 一种杀虫增效蛋白的制备方法及用途 | 申请号 | CN201010268069.4 | 专利类型 | 发明专利 | 公开（公告）号 | CN101942462A | 公开（授权）日 | 2011.01.12 | 申请（专利权）人 | 中国科学院武汉病毒研究所 | 发明（设计）人 | 孙修炼;刘向阳 | 主分类号 | C12N15/34(2006.01)I | IPC主分类号 | C12N15/34(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C07K14/01(2006.01)I;A01N63/00(2006.01)I;A01N63/02(2006.01)I;A01P7/04(2006.01)I | 专利有效期 | 一种杀虫增效蛋白的制备方法及用途 至一种杀虫增效蛋白的制备方法及用途 | 法律状态 | 专利申请权、专利权的转移 | 说明书摘要 | 本发明公开了一种杀虫增效蛋白的制备方法及用途，其步骤：A）根据CpGVorf13的序列，设计引物，以CpGV基因组DNA为模板进行PCR扩增截短片段；B）PCR产物用琼脂糖凝胶电泳进行鉴定，用PCR回收纯化试剂盒回收PCR产物，与pMD18-T载体连接；C）提取质粒酶切鉴定阳性克隆子并测序，回收目的片断，亚克隆至表达载体pET-28a，为pET-28a-Cp13；D）将pET-28a-Cp13转化大肠杆菌DH5α，提取质粒鉴定，用质粒转化大肠杆菌BL21，加IPTG诱导表达；E）SDS-PAGE分析检测表达产物，得到Cp13蛋白。表达的Cp13蛋白可采用His纯化树脂Ni-NTA进行纯化。原核表达的Cp13能显著提高多种昆虫病毒和Bt药物的杀虫活性，破坏昆虫中肠围食膜的完整性。该增效蛋白使用方便，安全环保，无毒性无副作用。 |
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