一种重组质粒、构建方法和用于红霉素产生菌的遗传改造

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专利名称 一种重组质粒、构建方法和用于红霉素产生菌的遗传改造 申请号 CN200710173704.9 专利类型 发明专利 公开(公告)号 CN101285073 公开(授权)日 2008.10.15 申请(专利权)人 中国科学院上海有机化学研究所;华东理工大学 发明(设计)人 刘文;张嗣良;陈云;邓玮 主分类号 C12N15/80(2006.01)I IPC主分类号 C12N15/80(2006.01)I;C12N15/52(2006.01)I;C12N1/15(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N 专利有效期 一种重组质粒、构建方法和用于红霉素产生菌的遗传改造 至一种重组质粒、构建方法和用于红霉素产生菌的遗传改造 法律状态 实质审查的生效 说明书摘要 本发明公开了一种基因工程构建的重组质粒,以及该重组质粒的构建方法 和该质粒在红霉素产生菌遗传改造上的应用。重组质粒由载体和在多克隆位点 加入一个含有红霉素启动子,大环骨架上碳12位羟基化酶,碳霉糖甲基化酶组 合的片段组成,其中载体为大肠杆菌和链霉菌穿梭质粒,可以为pKC1139、 pOJ260、pWHM3或pSET152等类似的载体;所述的组合,主要特征是含有红霉 素启动子(ErmE*)为m个,羟基化酶(EryK)为n个,甲基化酶(EryG)为 k个,其中,m=1~3,n=1~5,k=0~4,它们可以任意搭配组合。使用这 样的重组质粒对红霉素产生菌进行遗传改造,可以明显改善组分,甚至获得只 产生有效单一组分的生产菌种。

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