用于检测环境中类雌激素化合物的双杂交酵母以及生物测试方法

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专利名称 用于检测环境中类雌激素化合物的双杂交酵母以及生物测试方法 申请号 CN200710308509.2 专利类型 发明专利 公开(公告)号 CN101469315 公开(授权)日 2009.07.01 申请(专利权)人 中国科学院生态环境研究中心 发明(设计)人 王子健;李剑;马梅;饶凯锋 主分类号 C12N1/19(2006.01)I IPC主分类号 C12N1/19(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I;C12R1/865(2006.01)N 专利有效期 用于检测环境中类雌激素化合物的双杂交酵母以及生物测试方法 至用于检测环境中类雌激素化合物的双杂交酵母以及生物测试方法 法律状态 实质审查的生效 说明书摘要 本发明提供一种用于检测环境样品中类雌激素化合物的双杂交酵母 及其制备方法,其中该酵母中含有pGBKT7-ER酵母表达质粒和 pGAD424-GRIP1酵母表达质粒,其中pGBKT7-hER酵母表达质粒包含雌 激素受体基因,pGAD424-GRIP1酵母表达质粒包含具有如SEQ ID No.2 所示序列的雌激素受体共激活因子基因片段。本发明还提供了一种检测环 境中类雌激素化合物的生物测试方法,其中包括将上述双杂交酵母细胞与 待测样品共培养,加入邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷的反应液进行反应,根 据终止反应后检测到的上清液在420nm处的吸光度值来计算类雌激素化 合物的浓度。本发明采用重组雌激素受体基因的双杂交酵母用于测试,更 加接近哺乳动物内分泌系统的真实作用情况,构建的酵母细胞基因性状稳 定,易于培养、筛选,整个类雌激素效应的筛选过程操作简单,所需样品 量少,成本低廉。

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