| 专利名称 | 一种聚乙二醇偶联结合超滤离心分离富集糖肽的方法 | 申请号 | CN201110104461.X | 专利类型 | 发明专利 | 公开（公告）号 | CN102757992A | 公开（授权）日 | 2012.10.31 | 申请（专利权）人 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 发明（设计）人 | 张丽华;侯春彦;杨开广;梁振;张玉奎 | 主分类号 | C12P21/00(2006.01)I | IPC主分类号 | C12P21/00(2006.01)I;C07K14/00(2006.01)I;C07K9/00(2006.01)I;C07K1/34(2006.01)I | 专利有效期 | 一种聚乙二醇偶联结合超滤离心分离富集糖肽的方法 至一种聚乙二醇偶联结合超滤离心分离富集糖肽的方法 | 法律状态 | 实质审查的生效 | 说明书摘要 | 本发明涉及糖肽的富集方法，具体地说是一种聚乙二醇偶联结合超滤分离富集糖肽的方法；N-连接糖蛋白质经过酶解产生的肽段混合物中加入高碘酸，糖链上的顺式邻二醇经氧化生成醛基，通过反相色谱除盐去除多余的高碘酸；向氧化后的肽段混合物中加入单甲氧基聚乙二醇酰肼（mPEG-Hz），在乙酸－乙酸钠缓冲液中糖肽与聚乙二醇偶联；将反应产物加入超滤离心管样品池中，经过清洗和离心过滤将糖肽和非糖肽分开；糖肽保留在滤膜内，非糖肽离心到滤膜外；向样品池中再加入肽N-糖苷酶F（PNGaseF）的碳酸氢铵缓冲液，酶解后将肽段从其糖基化位点处酶切下来，经过离心即可获得含糖基化位点的肽段。本发明的优点为：是一种普适性的糖肽富集方法，具有较好的选择性，操作步骤简单，非特性吸附的清洗比较容易，成本较低。 |
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