| 专利名称 | 突变青霉素G酰化酶、其重组表达质粒及转化的工程菌株 | 申请号 | CN200610118042.0 | 专利类型 | 发明专利 | 公开（公告）号 | CN101177688 | 公开（授权）日 | 2008.05.14 | 申请（专利权）人 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 发明（设计）人 | 黄鹤;张磐;王金刚;袁中一;杨晟;姜卫红 | 主分类号 | C12N15/55(2006.01)I | IPC主分类号 | C12N15/55(2006.01)I;C12N9/86(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I | 专利有效期 | 突变青霉素G酰化酶、其重组表达质粒及转化的工程菌株 至突变青霉素G酰化酶、其重组表达质粒及转化的工程菌株 | 法律状态 | 授权 | 说明书摘要 | 本发明通过基因定点突变的方法获得的青霉素G酰化酶合成性能提高的基因、突变质 粒、工程菌，并可在将工程菌发酵纯化后，获得青霉素G酰化酶合成性能提高的突变酶。 本发明先用Kpn I和Pst I双酶切pUC18，然后用T4 polymerase补平，自连得到pZ01； 用EcoR I酶切pZ01，再和同样用EcoR I酶切的pEES102连接，获得重组质粒pY020； 再以pY020为模板质粒，利用TaKaRa MuTanBEST Kit对B.megaterium PGA进行定点突 变，从而获得青霉素G酰化酶合成性能提高的突变质粒。将该突变质粒转化枯草杆菌获得 需要的工程菌。将该工程菌放大发酵，纯化后可获得合成产物/水解产物的比值及7-ADCA 最大转化率提高的突变酶。 |
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