重组黑曲霉发酵生产蛋白酶 K 技术

重组黑曲霉发酵生产蛋白酶 K 技术

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由真菌(林伯氏白色念球菌,Tritirachium album Limber)产生的蛋白酶 K,是一种枯草蛋白酶类的高活性,切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸 的羧基端肽键,用于生物样品中蛋白质的一般降解。此酶经纯化去除了 RNA 酶和 DNA 酶活性。由于蛋白酶 K 在尿素和 SDS 中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体 DNA,蛋白质印迹以及去除 DNA 和 RNA 制备中的核酸酶。主要用于基因诊断试剂盒、基因组 DNA 提取试剂盒、RNA 提取试剂盒中 去除 DNA 和 RNA 制备中的核酸酶,也可以用于提取组织中非蛋白成份降解含有蛋白 质的杂质。蛋白酶 K 于 1989 年在细菌中成功表达并投入市场。

此项目新开发出来由黑曲霉生产的蛋白酶 K。其蛋白酶 K 是分泌型,主要产于胞外,因此纯化过程简单,成本较低。

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